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技術(shù)文章 / article
人結(jié)腸癌細(xì)胞株為何多取上皮細(xì)胞樣？
原載自：www.shanyaolaigou.cn[技術(shù)資料頻道] 2025-11-17 瀏覽次數(shù)：174
打開(kāi)ATCC或中科院細(xì)胞庫(kù)目錄，HT-29、HCT116、LoVo、SW480……等人結(jié)腸癌細(xì)胞株都標(biāo)注“epithelial-like”。明明腫瘤微環(huán)境里還有成纖維、內(nèi)皮、免疫細(xì)胞，為何建株時(shí)偏偏只剩“上皮臉”？
一、起點(diǎn)決定方向
結(jié)腸壁分四層，癌變90%始于最內(nèi)層“粘膜上皮”。腺上皮細(xì)胞自帶端粒酶再激活、Wnt/β-catenin突變等“第一擊”，最易永生化；而平滑肌、間質(zhì)細(xì)胞缺乏這些驅(qū)動(dòng)突變，自然成不了“氣候”。
二、酶消化“偏心”
建株常用膠原酶Ⅺ+Dispase雞尾酒，作用靶點(diǎn)是間質(zhì)膠原，目的在于“松”開(kāi)上皮管腔。結(jié)果上皮細(xì)胞被溫和剝離，成纖維細(xì)胞雖也被釋放，卻因其對(duì)胰酶更敏感、貼壁快而被后續(xù)差速貼壁2 h淘汰；上皮團(tuán)塊靠E-cadherin緊緊抱成球，反而保留下來(lái)。
三、培養(yǎng)基“拉偏架”
經(jīng)典DMEM/F12+10%FBS里，表皮生長(zhǎng)因子EGF、胰島素是標(biāo)配，它們通過(guò)EGFR→MAPK軸驅(qū)動(dòng)上皮增殖；而對(duì)成纖維細(xì)胞，高濃度EGF反而促分化、易衰老。兩周后，上皮長(zhǎng)成“鋪路石”樣集落，間質(zhì)細(xì)胞逐漸凋亡，視野里就只剩上皮樣細(xì)胞。
四、形態(tài)可塑
腫瘤組織中原有部分細(xì)胞已發(fā)生EMT（上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化），呈梭形。但體外缺少TGF-β、IL-6等間質(zhì)信號(hào)，E-cadherin重新上調(diào)，細(xì)胞“回滾”成上皮狀態(tài)，表現(xiàn)為鋪路石或島狀排列，于是被記錄為“epithelial-like”。
五、實(shí)用考量
上皮細(xì)胞角蛋白（CK20、CK8/18）陽(yáng)性、E-cadherin膜表達(dá)，標(biāo)志清晰，可做免疫熒光、類(lèi)器官3D培養(yǎng)；若混雜大量vimentin陽(yáng)性的間質(zhì)細(xì)胞，不僅影響轉(zhuǎn)染效率，還會(huì)干擾藥物靶點(diǎn)判定。科研需求反向推動(dòng)“選上皮、棄間質(zhì)”。
人結(jié)腸癌細(xì)胞株之所以“多取上皮細(xì)胞樣”，并非因?yàn)橄聦哟渭?xì)胞不想永生，而是解剖起點(diǎn)、酶消化偏愛(ài)、培養(yǎng)條件篩選與科研取向共同寫(xiě)下的“劇本”。了解這層偏向，才能提醒我們：研究腫瘤微環(huán)境時(shí)，別忘了把“被丟掉”的間質(zhì)細(xì)胞重新請(qǐng)回舞臺(tái)。
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