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細胞株的STR鑒定技術(shù)分享

原載自:www.shanyaolaigou.cn[技術(shù)資料頻道]  2025-03-17  瀏覽次數(shù):1011

  細胞株的STR(短串聯(lián)重復序列)鑒定技術(shù)在細胞生物學研究中具有重要的地位。STR鑒定技術(shù)原理是基于不同個體或細胞株在基因組的特定區(qū)域中,短串聯(lián)重復序列的重復次數(shù)存在差異。這些短串聯(lián)重復序列廣泛分布于人類及多種生物的基因組中,具有高度的多態(tài)性。通過對細胞株的DNA進行提取,利用特定的引物對目標STR位點進行PCR擴增,然后通過電泳分離不同長度的DNA片段,從而確定細胞株的遺傳特征。
  該技術(shù)的操作流程相對復雜但精確。首先要有高質(zhì)量的細胞樣本,從細胞培養(yǎng)容器中收集適量的細胞,確保細胞數(shù)量足夠且活性良好。接著進行DNA提取,這一過程要嚴格按照試劑盒的說明操作,以獲得高純度、完整的DNA。隨后是PCR擴增,根據(jù)選定的STR位點設(shè)計特異性引物,優(yōu)化PCR反應(yīng)體系,包括引物濃度、dNTP濃度、Taq酶量等,以確保高效、特異的擴增。擴增產(chǎn)物經(jīng)過電泳分離后,通過專業(yè)的分析軟件對電泳圖譜進行分析,確定每個STR位點的重復次數(shù),從而得到細胞株的STR圖譜。
  STR鑒定技術(shù)在細胞株鑒定中有諸多優(yōu)勢。其分辨率高,能夠區(qū)分單個堿基的差異,對于確認細胞株的純度和身份非常準確。它具有良好的穩(wěn)定性和重復性,只要實驗條件一致,不同實驗室得到的結(jié)果具有可比性。而且可以同時對多個STR位點進行檢測,提高了鑒定的效率和準確性。
  然而,該技術(shù)也存在一些局限性。例如在實驗過程中容易受到污染,導致結(jié)果出現(xiàn)偏差。對DNA質(zhì)量要求較高,如果DNA發(fā)生降解或存在雜質(zhì),可能影響PCR擴增效果。此外,對于一些特殊的細胞株,可能需要優(yōu)化引物設(shè)計或調(diào)整PCR反應(yīng)條件,才能獲得理想的結(jié)果。
  細胞株的STR鑒定技術(shù)為細胞生物學研究提供了可靠的工具,有助于保證細胞株的準確性和一致性,在細胞庫管理、遺傳研究、藥物研發(fā)等領(lǐng)域發(fā)揮著難以替代的作用。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,相信它將在更多方面展現(xiàn)出更大的價值。

 

 

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